转染方法

原理

优点

缺点

化学转染方法

阳离子脂质体

脂质体是一种人工的脂双层膜。阳离子脂质体通常由阳离子和两性离子脂质组成。在DNA与脂质体形成lipoplex的过程中，阳离子脂质体起到复合和凝集DNA的作用，同时也有助于复合物与细胞膜的结合

操作简单快速；

转染效率高且重复性好；

可用于转染DNA、RNA和蛋白；

可用于瞬时转染和稳定转染

会受到血清的抑制，降低转染效率；

脂质体中的核心组分对细胞毒性较大

磷酸钙共沉淀

核酸以磷酸钙-DNA 共沉淀物的形式出现时，可使DNA 附在细胞表面，利于细胞吞入摄取，或通过细胞膜脂相收缩时裂开的空隙进入细胞内

便宜，使用广泛

转染效率差，不稳定；

细胞毒性大；

葡聚糖

它是一种阳离子聚合物，可以与带负电荷的DNA和蛋白质结合，进而被细胞吞噬

多用于贴壁细胞

一些细胞类型对葡聚糖特别敏感，可能会发生形态变化或者抑制细胞生长

其他阳离子聚合物

带正电的聚合物与核酸带负电的磷酸基团形成带正电的复合物后与细胞表面带负电的蛋白多糖相互作用，并通过内吞作用进入细胞。阳离子聚合物和阳离子脂质体最大的区别在于阳离子聚合物不含疏水部分而完全溶于水，可以方便地进行化学修饰，且不会像脂质体一样破坏细胞结构，所以相对毒性较低。目前使用最广泛的阳离子聚合物转染试剂是PEI（聚乙烯亚胺）可以标注我们公司的货号

成本低；

免疫原性低；

转染效率高且稳定；

适用于悬浮细胞或贴壁细胞

细胞毒性较大；

常用于瞬时转染；

不能生物降解

物理转染方法

电穿孔

利用高脉冲电压破坏细胞膜电位，使得DNA 通过膜上形成的小孔导入稳定/瞬时性转染

适用所有细胞类型；

适用瞬时转染和稳定转染；

不需要载体

需要一定的电转设备；

需要优化电转脉冲和电压参数；

细胞致死率高；

DNA和细胞用量大

显微注射

利用管尖极细（0.1至0.5μm）的玻璃微量注射针，将外源基因片段直接注射到原核期胚或培养的细胞中

适用所有细胞类型；

可进行单细胞转染；

不需要载体；

不限制转入的基因大小和数量；

多用于转基因

设备昂贵；

技术要求高；

细胞致死率高

生物转染方法

病毒转染

病毒该载体可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上，从而达到持久性表达

转染效率高；

适用于难转染的细胞系；